核酸蛋白第四色播放器仪使用说明和工作原理
一．简介
核酸蛋白第四色播放器仪、紫外第四色播放器仪是液相色谱仪的一种紫外第四色播放器装置，HD–21C–A、HD–21C–B型核酸蛋白第四色播放器仪、紫外第四色播放器仪是根据生命科学的发展对于现代色谱仪器的要求而改进设计的一种新型紫外第四色播放器仪。该仪器在创新方面的主要特点为：
1．该仪器除了配有10mV记录仪输出信号外，还同时配有适合于计算机积分仪的输出接口﹙HD–21C–B型﹚，这样很方便于构成色谱工作站系统﹙可同时进行计算机和记录仪信号输出，亦可省去记录仪﹚
2．仪器的数字显示设计为固定光吸收A显示和可变量程光吸收A显示两种可选模式，这样可方便于规范化读数﹙特别是可应用于药品生产的GMP工艺规范化管理﹚，同时亦可根据科研需要进行可变量程的高灵敏度读数，这样可方便于对低浓度样品第四色播放器﹙HD–21C–B型﹚。
3．仪器采用新型进口R212光电倍增管和改进型电路结构﹙HD–97–1光电倍增管为1P28型﹚，仪器全部采用数字显示2个OD值表，用户可直接读出光密度A值，从而使仪器灵敏度高、峰值重复性好、漂移低、性能稳定、质量可靠、使用方便等优点。
该仪器配上层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪（色谱工作站）等，即组成一套完整的液相色谱分离层析仪（系统）。它可应用于现代生物学研究、药物测定、农业科研、化工、食品及医疗科研单位对具有紫外吸收的生物样品作定性、定量分析。它具有微量样品池进行连续第四色播放器，*后达到分离生物大分子。
二．主要技术性能
⑴．核酸蛋白第四色播放器仪波长范围：254nm、280nm﹙214nm﹚
⑵．量程灵敏度范围：0-100℅T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、0-0.01A.
⑶．记录仪输出：10mV ⑷．积分仪输出：0.1A/mV
⑸．流式样品池：容积100微、光程5毫米
（微量样品池：容积80微升、光程3毫米）
⑹．数显模式：固定A量程读数（0-2.0A）：可变A量程读数（0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B型）
⑺．量程在0.05A档时：噪音≦0.002A ⑻．工作环境温度：-5～35℃。
⑼．基线噪音：2×10-4；LED数字显示；仪器可连续工作1个月
⑽．仪器工作时不受到任何震动，周围不受磁场干扰。
⑾．电源：220VAC±10%50HZ ⑿．主机重量：5kg
三、仪器结构
核酸蛋白第四色播放器仪、紫外第四色播放器仪是单光路结构，由紫外第四色播放器器、电源和记录仪三部分组成，由紫外第四色播放器器和电源连结，属单体结构，现将其构造分别说明如下：
⑴、 紫外第四色播放器仪：
它由一组光源，四块干涉滤色片，一块聚光透镜，一只样品池，一只光电倍增管，一块放大板和一块
对数板等组成。面板上有聚乙烯塑料管的进样口和出样口，A调零以及调节“光量”大小旋钮（光量大下以箭头表示）。还有光源指示灯、电源指示灯以及量程转换旋钮。
光源主要提供214nm、220nm、254nm、280nm、340nm分别作为第四色播放器核酸、蛋白、酶、多肽等的光源。
滤色器由214nm、220nm、254nm、280nm、340nm，四块干涉滤色片组成。从光源发出的光束除214nm、220nm、254nm、280nm、340nm谱线外尚含有其他波长的谱线，通过各自所对应的滤色片就把非主谱线波长以外的其他波长滤去，这就保证了仪器的单色性。
核酸蛋白第四色播放器仪除测214nm、254nm、280nm外，其他性能均同紫外第四色播放器仪。
样品池由石英玻璃管拉制而成，内径一般为3毫米左右，容积不大于100微升。
光电倍增管采用IP28或R212（进口）光电倍增管作为电转换器，具有灵敏度高，稳定性好的优点。紧靠在光电倍增管后的放大器是一高输入阻抗噪音的直流放大器，它把光电倍增管输出的光电流进一步放大，然后输入到对数转换器。
⑵、 电源
本仪器的电源部分是一个独立系统，单独安装在一机箱内。机箱内有两块电路板，一块是输出±12V和+27V的低压稳压电源板，另一块是带有高压负反馈的高压稳压电源板，它由一组输出-700V高压，作为光电倍增管和光源的供电电源，光源工作电压为160V左右，电源面板上装有电源开关、电源指示灯。在电源后面板上，装有电源插头座、保险丝座、记录仪信号插头座以及稳压电源插座。
从光源发出的光经聚光透镜，狭缝，滤色器聚焦到样品池上，此单色光通过样品池射到光电倍增管的光阴极面上，使光束由于样品浓度不同所引起透光强度的变化转换成光电流变化，此光电流经放大器放大，并输入到对数转换器、使透光率T转换成光吸收A输出即A=lg—=ε·CL式中ε为待测样品的摩尔消光系统，C为样品浓度，采用摩尔/升单位，L为光程，用厘米作单位。根据上式只要测出了A、L和ε就可求出样品浓度C。若从放大器直接输入到记录仪，则在记录仪上绘出的是样品透光率T变化的图谱，若从对数转换器输入到记录仪上、在记录仪上绘出的是样品光吸收变化的图谱。
四、使用说明和操作步骤
⑴、在仪器使用前，首先连接好所需配套仪器：层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪（色谱工作站）。将各类插头与插座接妥（220V电源）。
⑵、按下第四色播放器仪ON电源开关，电源指示灯亮，说明整台仪器电源开始工作，然后观察光源指示灯，如果亮了，表示光源已开始工作，整台仪器可进入工作状态，将第四色播放器仪波长旋钮旋到所需波长刻度上，把量程旋钮拨到100%T档（仪器预热20分钟，待基线平直后可加样测试）。
⑶、接通记录仪电源开关，使电源开关拨到“通”指示灯亮。可根据记录仪说明书调换不同的纸速度，用户根据需要自行掌握，测量用10mV档。此时记录仪指针从零点开始向右移动某一刻度，调节第四色播放器仪“光量”旋钮使指针停留在记录仪大约中间位置5mV左右数字显示为50左右。。
⑷、把第四色播放器仪进样口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝胶层析柱中缓冲液流过第四色播放器仪（恒流泵第四色网页视凝胶层析柱大小选1-3ml/min）。用“调零”调整吸光度A值为0（量程开关拨到100%T调节光量旋钮，使记录仪指针在10mV数字显示为100，即透光率为100%。把量程开关拨到“0.05A”档，缓慢调节A调零旋钮，使记录仪指示在“O”位，第四色播放器仪显示为“O”）。
⑸、以上步骤结束，层析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品，洗脱前再调一次吸光度0点。洗脱过程结束前不可再调节“调零”旋钮。当洗脱液流过第四色播放器仪时，吸光度显示大于零的数值，吸光度数值大小随样品的浓度而变化。洗脱完毕后吸光度显示为稍大于零的数值。
⑹、数字显示吸光度和记录仪自动绘制吸光度图谱是两个互相独立的第四色播放器系统，数字显示吸光度与记录仪所绘峰值大小没有直接关系，不可互相换算。
⑺、测试完毕后，必须切断电源，并用蒸馏水清洗样品池和聚乙烯塑料管。